三級(jí)生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室常用于微生物和生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室，因?yàn)閷?shí)驗(yàn)對(duì)象會(huì)有高致病性動(dòng)物病原微生物 ，所以除了對(duì)設(shè)計(jì)和裝修包括實(shí)驗(yàn)室家具、設(shè)備都是有較高的要求以外，最為重要的是在實(shí)操過(guò)程中按照安全操作指引工作，在生物安全實(shí)驗(yàn)室里，按照安全指引和標(biāo)準(zhǔn)手冊(cè)操作是每一位實(shí)驗(yàn)室工作人員必須掌握的技能和考核準(zhǔn)則。CEIDI西遞整理總結(jié)了一部分相關(guān)內(nèi)容，供大家學(xué)習(xí)參考。以三級(jí)生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室（動(dòng)物房）為例，動(dòng)物室的入口處必須有生物危害的標(biāo)志。危害標(biāo)志應(yīng)說(shuō)明使用病原微生物的種類(lèi),負(fù)責(zé)人的名單和電話號(hào)碼，特別要指出對(duì)進(jìn)入動(dòng)物室人員的特殊要求(如免疫接種和面罩)。
三級(jí)生物安全實(shí)驗(yàn)室（動(dòng)物實(shí)驗(yàn)）要求及規(guī)范 | CEIDI西遞
一、標(biāo)準(zhǔn)操作
1．制定安全手冊(cè)或手冊(cè)草案。除了制定緊急情況下的標(biāo)準(zhǔn)安全對(duì)策、操作程序和規(guī)章制度,還應(yīng)根據(jù)實(shí)際需要制定特殊適用的對(duì)策。
2．動(dòng)物室的入口處必須有生物危害的標(biāo)志。危害標(biāo)志應(yīng)說(shuō)明使用病原微生物的種類(lèi),負(fù)責(zé)人的名單和電話號(hào)碼，特別要指出對(duì)進(jìn)入動(dòng)物室人員的特殊要求(如免疫接種和面罩)。
3．限制對(duì)工作不熟悉的人員進(jìn)入動(dòng)物室。為了工作或服務(wù)必須進(jìn)入者,要告知他們工作中潛在的危險(xiǎn)。
4．所有動(dòng)物室的廢棄物(包括動(dòng)物組織、尸體、污染的墊料、動(dòng)物飼料、銳利物和其它垃圾)放入密閉的容器內(nèi)并加蓋，容器外表面消毒后進(jìn)行高壓蒸汽滅菌,然后建議焚燒。焚燒要合乎環(huán)保要求。
5．不允許在動(dòng)物室內(nèi)吃、喝、抽煙、處理隱形眼鏡和使用化妝品、儲(chǔ)藏人的食品。
6．所有實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程均須十分小心,以減少氣溶膠的產(chǎn)生和防止外溢。
7．操作傳染性材料以后所有設(shè)備表面和工作臺(tái)面用適當(dāng)?shù)南緞┻M(jìn)行常規(guī)消毒,特別是有傳染性材料外溢和其它污染時(shí)更要嚴(yán)格消毒。
8．建立評(píng)估暴露的方法,避免暴露。
9．對(duì)銳利物進(jìn)行安全操作。
10．工作人員操作培養(yǎng)物和動(dòng)物以后要洗手,離開(kāi)設(shè)施之前脫掉手套、洗手。
11．實(shí)驗(yàn)和實(shí)驗(yàn)輔助人員要經(jīng)過(guò)與工作有關(guān)的潛在危害防護(hù)的針對(duì)性培訓(xùn)。
12．所有收集的樣品應(yīng)貼上標(biāo)簽,放在能防止微生物傳播的傳遞容器內(nèi)。
13．動(dòng)物室應(yīng)有合適的醫(yī)療監(jiān)督,根據(jù)試驗(yàn)微生物或潛在微生物的危害程度，決定是否對(duì)實(shí)驗(yàn)人員進(jìn)行免疫接種或檢驗(yàn)(例如狂犬病疫苗和TB皮試)。如有必要,應(yīng)該實(shí)施血清監(jiān)測(cè)。
14．對(duì)工作人員進(jìn)行專(zhuān)業(yè)培訓(xùn),所有培訓(xùn)記錄要?dú)w檔。
15．嚴(yán)格執(zhí)行菌（毒）種保管和使用制度。
二、特殊操作
1．實(shí)驗(yàn)材料發(fā)生了外溢,要消毒打掃干凈。如果發(fā)生傳染性材料的暴露必須立刻向設(shè)施負(fù)責(zé)人報(bào)告,同時(shí)報(bào)國(guó)家獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室生物安全管理委員會(huì)，最后的處理評(píng)估報(bào)告，也要及時(shí)報(bào)國(guó)家獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室生物安全管理委員會(huì)，同時(shí)報(bào)實(shí)驗(yàn)室生物安全委員會(huì)回負(fù)責(zé)人。及時(shí)提供正確醫(yī)療評(píng)價(jià)、醫(yī)療監(jiān)督和處理并保存記錄。
2．用過(guò)的動(dòng)物籠具清洗拿出之前要高壓蒸汽滅菌或用其它方法消毒。設(shè)施內(nèi)儀器設(shè)備拿出檢修打包之前必須消毒。
3．與實(shí)驗(yàn)無(wú)關(guān)的物品和生物體不允許帶入動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室。
4．所有的動(dòng)物室內(nèi)廢棄物在焚燒或進(jìn)行其它最終處理之前必須高壓滅菌。
三、安全設(shè)備(初級(jí)防護(hù)屏障)
1．操作感染動(dòng)物時(shí)要戴手套,實(shí)驗(yàn)后以正確方式脫掉,在處理之前和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室其它廢棄物一同高壓滅菌。
2．操作具有產(chǎn)生氣溶膠危害的感染動(dòng)物和雞胚的尸體、收取的組織和體液，或鼻腔接種動(dòng)物時(shí)，應(yīng)該使用Ⅱ級(jí)以上生物安全柜，戴口罩或面具。
3．在危害評(píng)估確認(rèn)的基礎(chǔ)上使用個(gè)人防護(hù)器具。操作傳染性材料和感染動(dòng)物都要使用個(gè)體防護(hù)器具。工作人員進(jìn)入動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室前要按規(guī)定穿戴工作服,再穿特殊防護(hù)服。不得穿前開(kāi)口的工作服。離開(kāi)動(dòng)物室前必須脫掉工作服，并進(jìn)行適合的包裝，消毒后清洗。
4．將感染動(dòng)物飼養(yǎng)放在Ⅱ級(jí)生物安全設(shè)備中（如負(fù)壓隔離器）。
四、設(shè)施(次級(jí)防護(hù)屏障)
三級(jí)動(dòng)物生物安全實(shí)驗(yàn)室的感染動(dòng)物在Ⅱ級(jí)或Ⅱ級(jí)以上生物安全設(shè)備中（如負(fù)壓隔離器）飼養(yǎng)，所有操作均在Ⅱ級(jí)或Ⅱ級(jí)以上生物安全柜內(nèi)進(jìn)行，其次級(jí)屏障標(biāo)準(zhǔn)如下：
1．進(jìn)入設(shè)施的門(mén)要安裝閉門(mén)器。外門(mén)可由門(mén)禁系統(tǒng)控制。進(jìn)入后為一更室（清潔區(qū)），其后是二更室（半污染區(qū)）。傳遞窗（室）和雙扉高壓滅菌器設(shè)置在清潔區(qū)與半污染區(qū)之間，為實(shí)驗(yàn)用品、設(shè)備和廢棄物進(jìn)出設(shè)施提供安全通道。從二更室進(jìn)入動(dòng)物室（污染區(qū)）經(jīng)過(guò)自動(dòng)互連鎖門(mén)的緩沖室,進(jìn)入動(dòng)物房的門(mén)要向外開(kāi)。
2．建筑物中的動(dòng)物設(shè)施與人員活動(dòng)區(qū)分開(kāi)。
3．每個(gè)動(dòng)物室靠近出口處設(shè)置一個(gè)非手動(dòng)洗手池,每次使用后洗手池水封處用適合的消毒劑充滿(mǎn)。
4．設(shè)施的設(shè)計(jì)、結(jié)構(gòu)要便于打掃和保持衛(wèi)生。內(nèi)表面(墻、地板、天棚)應(yīng)防水、耐腐。穿過(guò)墻、地板和天棚物件的穿孔要密封,管道開(kāi)口周?chē)芊?門(mén)和門(mén)框間也要密封。
5．氣流方向始終保證由清潔區(qū)流向污染區(qū)，由低污染區(qū)流向高污染區(qū)。空調(diào)系統(tǒng)應(yīng)安裝壓力無(wú)關(guān)裝置，以保證系統(tǒng)壓力平衡，排風(fēng)應(yīng)采用一用一備自動(dòng)切換系統(tǒng)。發(fā)生緊急情況時(shí)，應(yīng)關(guān)閉送風(fēng)系統(tǒng)，維持排風(fēng)，保證實(shí)驗(yàn)室內(nèi)安全負(fù)壓。
6．設(shè)施內(nèi)的附屬配件,如燈架、氣道和功能管道排列盡可能整齊、減小水平表面。
7．所有窗戶(hù)都要牢固和密封。
8．有真空(抽氣)管道(中心或局部)的,每一個(gè)管道連接應(yīng)該安裝液體消毒罐和HEPA,安裝在靠近使用點(diǎn)或靠近開(kāi)關(guān)處。過(guò)濾器安裝應(yīng)易于消毒更換。
9．所有地漏的水封始終充以適當(dāng)?shù)南緞?
10．供氣需經(jīng)HEPA過(guò)濾。排出的氣體必須經(jīng)過(guò)兩級(jí)HEPA過(guò)濾排放，不允許在任何區(qū)域循環(huán)使用。
①實(shí)驗(yàn)室實(shí)驗(yàn)室送風(fēng)口應(yīng)在一側(cè)的棚頂，出風(fēng)口應(yīng)在對(duì)面墻體的下部，盡量減少室內(nèi)氣流死角。保持單向氣流，矢流方式較為合適。
②室內(nèi)潔凈度高于萬(wàn)級(jí)。
③Ⅱ級(jí)生物安全柜每年檢測(cè)一次。2A型的排氣可進(jìn)入室內(nèi)，2B2型安全柜和Ⅲ級(jí)安全柜的排風(fēng)要通過(guò)實(shí)驗(yàn)室總排風(fēng)系統(tǒng)排出。如果Ⅲ級(jí)安全柜是帶有二次HEPA過(guò)濾、移動(dòng)式，氣流亦可在室內(nèi)自循環(huán)。
④ 實(shí)驗(yàn)室門(mén)口安裝可視裝置，能夠確切表明進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室的氣流方向。
11．動(dòng)物籠在洗刷池內(nèi)清洗,如用機(jī)器清洗最終溫度達(dá)到82℃。
12．感染性廢棄物從設(shè)施拿出之前必須高壓滅菌。
13．照明要適應(yīng)所有的活動(dòng),不反射耀眼,以免影響視覺(jué)。
